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  AFM/TIRF force clamp measurements of neurosecretory vesicle tethers reveal characteristic unfolding steps.

Harris, M. C., Cislo, D., Lenz, J. S., Umbach, C., & Lindau, M. (2017). AFM/TIRF force clamp measurements of neurosecretory vesicle tethers reveal characteristic unfolding steps. PLoS One, 12(3): e0173993. doi:10.1371/journal.pone.0173993.

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Urheber

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 Urheber:
Harris, M. C., Autor
Cislo, D., Autor
Lenz, J. S., Autor
Umbach, C., Autor
Lindau, M.1, Autor           
Affiliations:
1Research Group of Nanoscale Cell Biology, MPI for Biophysical Chemistry, Max Planck Society, ou_1832294              

Inhalt

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Schlagwörter: -
 Zusammenfassung: Although several proteins have been implicated in secretory vesicle tethering, the identity and mechanical properties of the components forming the physical vesicle-plasma membrane link remain unknown. Here we present the first experimental measurements of nanomechanical properties of secretory vesicle-plasma membrane tethers using combined AFM force clamp and TIRF microscopy on membrane sheets from PC12 cells expressing the vesicle marker ANF-eGFP. Application of pulling forces generated tether extensions composed of multiple steps with variable length. The frequency of short (<10 nm) tether extension events was markedly higher when a fluorescent vesicle was present at the cantilever tip and increased in the presence of GTPγS, indicating that these events reflect specifically the properties of vesicle-plasma membrane tethers. The magnitude of the short tether extension events is consistent with extension lengths expected from progressive unfolding of individual helices of the exocyst complex, supporting its direct role in forming the physical vesicle-plasma membrane link.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2017-03-21
 Publikationsstatus: Online veröffentlicht
 Seiten: -
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Identifikatoren: DOI: 10.1371/journal.pone.0173993
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: PLoS One
Genre der Quelle: Zeitschrift
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Ort, Verlag, Ausgabe: -
Seiten: 20 Band / Heft: 12 (3) Artikelnummer: e0173993 Start- / Endseite: - Identifikator: -