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  Die Herausforderung der Analyse von intrazellulären Metaboliten in Säugerzellen

Ritter, J. B., Genzel, Y., & Reichl, U. (2006). Die Herausforderung der Analyse von intrazellulären Metaboliten in Säugerzellen. Poster presented at 24. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, Wiesbaden, Germany.

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Item Permalink: http://hdl.handle.net/11858/00-001M-0000-0013-99AE-9 Version Permalink: http://hdl.handle.net/11858/00-001M-0000-0025-20A9-A
Genre: Poster

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 Creators:
Ritter, J. B.1, Author              
Genzel, Y.1, Author              
Reichl, U.1, 2, Author              
Affiliations:
1Bioprocess Engineering, Max Planck Institute for Dynamics of Complex Technical Systems, Max Planck Society, ou_1738140              
2Otto-von-Guericke-Universität Magdeburg, ou_1738156              

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Free keywords: -
 Abstract: Die Betrachtung des Energiestoffwechsels ist bei vielen Zellkulturprozessen entscheidend für Optimierungsansätze. In Standardprozessen werden typischerweise nur einige extrazelluläre Substrate und Stoffwechselprodukte wie z.B. Glukose, Laktat und Aminosäuren gemessen. Ein besseres Verständnis über den physiologischen Zustand der Zellen könnte aus der Analyse intrazellulärer Metabolitkonzentrationen sowie von Stoffflussverteilungen im Zusammenhang mit Modelierungsansätzen gewonnen werden. In dieser Arbeit untersuchen wir intrazelluläre Metabolitpools einer Reihe von Stoffwechselprodukten aus dem Zentralstoffwechsel in tierischen Zellen für einen Influenza Impfstoffproduktionsprozess. Unser Interesse gilt vor allem den Unterschieden zwischen verschiedenen Zelllinien wie auch Medien während des Zellwachstums und der Virusinfektion. Die Messungen wurden mittels Anionen-Austausch Chromatographie und Leitfähigkeit / UV-Detektion durchgeführt. Die Methode erlaubt eine gleichzeitige Analyse von Zuckerphosphaten, organischen Säuren, Nukleotiden und Zuckernukleotiden. Die Probenvorbereitung war bei diesen Messungen insbesondere für adhärente Zellen entscheidend und wurde deshalb sehr detailliert untersucht. Die chromatographisch bestimmten Konzentrationen von ATP wurden mit einem enzymatischen Test (Luziferin-Luziferase Assay) überprüft und stimmten weitgehend überein. Im Weiteren wurden die Metabolitpools im Verlauf einer Infektion mit Influenza Viren von MDCK (Madin-Darby canine kidney) Zellen mit einer Scheininfektion verglichen, wobei mehrere Metabolite deutliche Unterschiede aufwiesen.

Details

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Language(s): deu - German
 Dates: 2006
 Publication Status: Not specified
 Pages: -
 Publishing info: -
 Table of Contents: -
 Rev. Method: -
 Identifiers: eDoc: 293558
 Degree: -

Event

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Title: 24. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen
Place of Event: Wiesbaden, Germany
Start-/End Date: 2006-09-26 - 2006-09-29

Legal Case

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