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  Distribution of Formins in Cardiac Muscle: FHOD1 is a component of intercalated discs and costameres

Al Haj, A., Mazur, A. J., Radaszkiewicz, K., Radaszkiewicz, T., Makowiecka, A., Stopschinski, B. E., Schönichen, A., Geyer, M., & Mannherz, H. G. (2015). Distribution of Formins in Cardiac Muscle: FHOD1 is a component of intercalated discs and costameres. European Journal of Cell Biology: EJCB, 94(2), 101-113. doi:10.1016/j.ejcb.2014.11.003.

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資料種別: 学術論文

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作成者

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Al Haj, A., 著者
Mazur, A. J., 著者
Radaszkiewicz, K., 著者
Radaszkiewicz, T., 著者
Makowiecka, A., 著者
Stopschinski, B. E., 著者
Schönichen, A., 著者
Geyer, M.1, 著者           
Mannherz, H. G., 著者
所属:
1Research Group Physical Biochemistry, Center of Advanced European Studies and Research (caesar), Max Planck Society, ou_2173686              

内容説明

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キーワード: Actin cardiomyocyte FHOD1 intercalated discs
 要旨: Summary The formin homology domain-containing protein1 (FHOD1) suppresses actin polymerization by inhibiting nucleation, but bundles actin filaments and caps filament barbed ends. Two polyclonal antibodies against FHOD1 were generated against (i) its N-terminal sequence (residues 1-339) and (ii) a peptide corresponding the sequence from position 358 to 371, which is unique for FHOD1 and does not occur in its close relative FHOD3. After affinity purification both antibodies specifically stain purified full length FHOD1 and a band of similar molecular mass in homogenates of cardiac muscle. The antibody against the N-terminus of FHOD1 was used for immunostaining cells of established lines, primary neonatal (NRC) and adult (ARC) rat cardiomyocytes and demonstrated the presence of FHOD1 in HeLa and fibroblastic cells along stress fibres and within presumed lamellipodia and actin arcs. In NRCs and ARCs we observed a prominent staining of presumed intercalated discs (ICD). Immunostaining of sections of hearts with both anti-FHOD1 antibodies confirmed the presence of FHOD1 in ICDs and double immunostaining demonstrated its colocalisation with cadherin, plakoglobin and a probably slightly shifted localisation to connexin43. Similarly, immunostaining of isolated mouse or pig ICDs corroborated the presence of FHOD1 and its colocalisation with the mentioned cell junctional components. Anti-FHOD1 immunoblots of isolated ICDs demonstrated the presence of an immunreactive band comigrating with purified FHOD1. Conversely, an anti-peptide antibody specific for FHOD3 with no cross-reactivity against FHOD1 immunostained on sections of cardiac muscle and ARCs the myofibrils in a cross-striated pattern but not the ICDs. In addition, the anti-peptide-FHOD1 antibody stained the lateral sarcolemma of ARCs in a banded pattern. Double immunostaining with anti-cadherin and -integrin-�1 indicated the additional localisation of FHOD1 in costameres. Immunostaining of cardiac muscle sections or ARCs with antibodies against mDia3-FH2-domain showed colocalisation with cadherin along the lateral border of cardiomyocytes suggesting also ist presence in costameres.

資料詳細

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言語: eng - English
 日付: 2015
 出版の状態: 出版
 ページ: -
 出版情報: -
 目次: -
 査読: 査読あり
 識別子(DOI, ISBNなど): DOI: 10.1016/j.ejcb.2014.11.003
 学位: -

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出版物 1

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出版物名: European Journal of Cell Biology : EJCB
  その他 : Eur. J. Cell Biol.
種別: 学術雑誌
 著者・編者:
所属:
出版社, 出版地: Stuttgart : Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft.
ページ: - 巻号: 94 (2) 通巻号: - 開始・終了ページ: 101 - 113 識別子(ISBN, ISSN, DOIなど): ISSN: 0070-2463
CoNE: https://pure.mpg.de/cone/journals/resource/954925486755