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  Kinetic and structural characterization of the self-labeling protein tags HaloTag7, SNAP-tag, and CLIP-tag

Wilhelm, J., Kühn, S., Tarnawski, M., Gotthard, G., Tünnermann, J., Tänzer, T., et al. (2021). Kinetic and structural characterization of the self-labeling protein tags HaloTag7, SNAP-tag, and CLIP-tag. Biochemistry, 60(33), 2560-2575. doi:10.1021/acs.biochem.1c00258.

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Basisdaten

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Genre: Zeitschriftenartikel

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Biochem_60_2021_2560.pdf (beliebiger Volltext), 13MB
 
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Eingeschränkt (Max Planck Institute for Medical Research, MHMF; )
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application/pdf
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Biochem_60_2021_2560_Preprint.pdf (Preprint), 10MB
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Biochem_60_2021_2560_Preprint.pdf
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Öffentlich
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application/pdf / [MD5]
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Biochem_60_2021_2560_Suppl.pdf (Ergänzendes Material), 6MB
 
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Biochem_60_2021_2560_Suppl.pdf
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Eingeschränkt (Max Planck Institute for Medical Research, MHMF; )
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Externe Referenzen

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externe Referenz:
https://doi.org/10.1021/acs.biochem.1c00258 (beliebiger Volltext)
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https://pubs.acs.org/doi/pdf/10.1021/acs.biochem.1c00258 (beliebiger Volltext)
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Urheber

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 Urheber:
Wilhelm, Jonas1, Autor           
Kühn, Stefanie1, Autor           
Tarnawski, Miroslaw2, Autor           
Gotthard, Guillaume, Autor
Tünnermann, Jana1, Autor           
Tänzer, Timo, Autor
Karpenko, Julie, Autor
Mertes, Nicole1, Autor           
Xue, Lin1, Autor           
Uhrig, Ulrike, Autor
Reinstein, Jochen2, Autor           
Hiblot, Julien1, Autor           
Johnsson, Kai1, Autor           
Affiliations:
1Chemical Biology, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society, ou_2364732              
2Department of Biomolecular Mechanisms, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society, ou_1497700              

Inhalt

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Schlagwörter: Kinetic modeling, Fluorescence, Labeling, Fluorophores, Kinetics
 Zusammenfassung: The self-labeling protein tags (SLPs) HaloTag7, SNAP-tag, and CLIP-tag allow the covalent labeling of fusion proteins with synthetic molecules for applications in bioimaging and biotechnology. To guide the selection of an SLP-substrate pair and provide guidelines for the design of substrates, we report a systematic and comparative study of the labeling kinetics and substrate specificities of HaloTag7, SNAP-tag, and CLIP-tag. HaloTag7 reaches almost diffusion-limited labeling rate constants with certain rhodamine substrates, which are more than 2 orders of magnitude higher than those of SNAP-tag for the corresponding substrates. SNAP-tag labeling rate constants, however, are less affected by the structure of the label than those of HaloTag7, which vary over 6 orders of magnitude for commonly employed substrates. Determining the crystal structures of HaloTag7 and SNAP-tag labeled with fluorescent substrates allowed us to rationalize their substrate preferences. We also demonstrate how these insights can be exploited to design substrates with improved labeling kinetics.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2021-07-232021-05-032021-08-022021-08-24
 Publikationsstatus: Erschienen
 Seiten: 16
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: Biochemistry
Genre der Quelle: Zeitschrift
 Urheber:
Affiliations:
Ort, Verlag, Ausgabe: Columbus, Ohio : American Chemical Society
Seiten: - Band / Heft: 60 (33) Artikelnummer: - Start- / Endseite: 2560 - 2575 Identifikator: ISSN: 0006-2960
CoNE: https://pure.mpg.de/cone/journals/resource/954925384103