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  Optimal precision and accuracy in 4Pi-STORM using dynamic spline PSF models

Bates, M., Keller-Findeisen, J., Przybylski, A., Hüper, A., Stephan, T., Ilgen, P., et al. (2022). Optimal precision and accuracy in 4Pi-STORM using dynamic spline PSF models. Nature Methods, 19(5), 603-612. doi:10.1038/s41592-022-01465-8.

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Externe Referenzen

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https://www.nature.com/articles/s41592-022-01465-8#Sec43 (beliebiger Volltext)
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Urheber

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 Urheber:
Bates, M., Autor           
Keller-Findeisen, J., Autor           
Przybylski, A., Autor           
Hüper, A., Autor
Stephan, T., Autor           
Ilgen, P., Autor           
Cereceda Delgado, A. R.1, Autor           
D’Este, E.2, Autor           
Egner, A., Autor
Jakobs, S., Autor           
Sahl, S. J., Autor           
Hell, S. W.1, Autor           
Affiliations:
1Optical Nanoscopy, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society, ou_2364730              
2Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society, ou_1125545              

Inhalt

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Schlagwörter: Fluorescence imaging; Single-molecule biophysics; Super-resolution microscopy
 Zusammenfassung: Coherent fluorescence imaging with two objective lenses (4Pi detection) enables single-molecule localization microscopy with
sub-10 nm spatial resolution in three dimensions. Despite its outstanding sensitivity, wider application of this technique has been hindered by complex instrumentation and the challenging nature of the data analysis. Here we report the development of a 4Pi-STORM microscope, which obtains optimal resolution and accuracy by modeling the 4Pi point spread function (PSF) dynamically while also using a simpler optical design. Dynamic spline PSF models incorporate fluctuations in the modulation phase of the experimentally determined PSF, capturing the temporal evolution of the optical system. Our method reaches the theoretical limits for precision and minimizes phase-wrapping artifacts by making full use of the information content of the
data. 4Pi-STORM achieves a near-isotropic three-dimensional localization precision of 2–3 nm, and we demonstrate its capa-bilities by investigating protein and nucleic acid organization in primary neurons and mammalian mitochondria.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2022-05-162022-05
 Publikationsstatus: Erschienen
 Seiten: 27
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Identifikatoren: DOI: 10.1038/s41592-022-01465-8
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: Nature Methods
  Andere : Nature Methods
Genre der Quelle: Zeitschrift
 Urheber:
Affiliations:
Ort, Verlag, Ausgabe: New York, NY : Nature Publishing Group
Seiten: - Band / Heft: 19 (5) Artikelnummer: - Start- / Endseite: 603 - 612 Identifikator: ISSN: 1548-7091
CoNE: https://pure.mpg.de/cone/journals/resource/111088195279556