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Abstract:
Es wurde eine Methode entwickelt, die es gestattet, während eines “Voltage-Clamp” Experiments nur diejenigen Ströme zu messen, die über ein begrenztes Stück der Somamembran fließen.
Axonströme, die beim üblichen “Voltage-Clamp” die Ergebnisse verfälschen, werden aus der Messung ausgeschlossen. Um dies zu erreichen, wird zusätzlich zur intracellulären Clampelektrode eine flammenpolierte Pipette auf das Zellsoma aufgesetzt. Das Innere der Pipette wird mittels eines einfachen weiteren Clampmechanismus auf dem Potential des Außenmilieus gehalten, die dazu erforderlichen Clampströme werden gemessen.
In einer alternativen Anwendung verbleibt das Zellinnere und dadurch auch das Axon mittels des intracellulären Clamps im Ruhezustand, während dem Pipetteninneren ein negativer Spannungssprung aufgeprägt wird. Über dem beobachteten Membranstück herrschen dann dieselben Spannungsverhältnisse wie oben. Diese letztere Methode ist immer dann von Vorteil, wenn bei größeren Zellen oder infolge sehr großer erforderlicher Stromdichten in der intracellulären Stromelektrode kein homogener Clamp über die ganze Zelle erreicht werden kann.