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  Preparing Planarian Cells for High-Content Fluorescence Microscopy Using RNA in Situ Hybridization and Immunocytochemistry

Grohme, M. A., Frank, O., & Rink, J. C. (2023). Preparing Planarian Cells for High-Content Fluorescence Microscopy Using RNA in Situ Hybridization and Immunocytochemistry. In L. Gentile (Ed.), Schmidtea Mediterranea: Methods and Protocols (pp. 121-155). New York, NY: Springer US. doi:10.1007/978-1-0716-3275-8_8.

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Basisdaten

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Datensatz-Permalink: https://hdl.handle.net/21.11116/0000-000E-06D4-C Versions-Permalink: https://hdl.handle.net/21.11116/0000-000E-06D5-B
Genre: Buchkapitel

Dateien

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:
978-1-0716-3275-8_8.pdf (Verlagsversion), 520KB
 
Datei-Permalink:
-
Name:
978-1-0716-3275-8_8.pdf
Beschreibung:
-
OA-Status:
Sichtbarkeit:
Eingeschränkt ( Max Planck Society (every institute); )
MIME-Typ / Prüfsumme:
application/pdf
Technische Metadaten:
Copyright Datum:
-
Copyright Info:
-
Lizenz:
-

Externe Referenzen

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Urheber

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 Urheber:
Grohme, Markus A., Autor
Frank, Olga, Autor
Rink, Jochen C.1, Autor           
Affiliations:
1Department of Tissue Dynamics and Regeneration, Max Planck Institute for Multidisciplinary Sciences, Max Planck Society, ou_3350274              

Inhalt

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Schlagwörter: -
 Zusammenfassung: High-content fluorescence microscopy combines the efficiency of high-throughput techniques with the ability to extract quantitative information from biological systems. Here we describe a modular collection of assays adapted for fixed planarian cells that enable multiplexed measurements of biomarkers in microwell plates. These include protocols for RNA fluorescent in situ hybridization (RNA FISH) as well as immunocytochemical protocols for quantifying proliferating cells targeting phosphorylated histone H3 as well as 5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU) incorporated into the nuclear DNA. The assays are compatible with planarians of virtually any size, as the tissue is disaggregated into a single-cell suspension before fixation and staining. By sharing many reagents with established planarian whole-mount staining protocols, preparation of samples for high-content microscopy adoption requires little additional investment.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2023-07-112023
 Publikationsstatus: Erschienen
 Seiten: -
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Identifikatoren: DOI: 10.1007/978-1-0716-3275-8_8
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: Schmidtea Mediterranea: Methods and Protocols
Genre der Quelle: Buch
 Urheber:
Gentile, Luca, Herausgeber
Affiliations:
-
Ort, Verlag, Ausgabe: New York, NY : Springer US
Seiten: - Band / Heft: 2680 Artikelnummer: - Start- / Endseite: 121 - 155 Identifikator: ISSN: 1064-3745
ISSN: 1940-6029
ISBN: 978-1-0716-3274-1
ISBN: 978-1-0716-3275-8

Quelle 2

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Titel: Methods in Molecular Biology
Genre der Quelle: Reihe
 Urheber:
Affiliations:
Ort, Verlag, Ausgabe: -
Seiten: - Band / Heft: 2680 Artikelnummer: - Start- / Endseite: - Identifikator: -