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Zeitschriftenartikel

Engineered HaloTag variants for fluorescence lifetime multiplexing

MPG-Autoren
/persons/resource/persons228818

Frei,  Michelle S.
Chemical Biology, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society;

/persons/resource/persons117897

Tarnawski,  Miroslaw
Department of Biomolecular Mechanisms, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society;

/persons/resource/persons243203

Koch,  Birgit
Chemical Biology, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society;

/persons/resource/persons212621

Hiblot,  Julien
Chemical Biology, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society;

/persons/resource/persons203696

Johnsson,  Kai
Chemical Biology, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society;

Externe Ressourcen

https://www.nature.com/articles/s41592-021-01341-x.pdf
(beliebiger Volltext)

https://www.nature.com/articles/s41592-021-01341-x
(beliebiger Volltext)

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41592-021-01341-x/MediaObjects/41592_2021_1341_MOESM1_ESM.pdf
(Ergänzendes Material)

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41592-021-01341-x/MediaObjects/41592_2021_1341_MOESM2_ESM.pdf
(Ergänzendes Material)

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41592-021-01341-x/MediaObjects/41592_2021_1341_MOESM3_ESM.avi
(Ergänzendes Material)

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41592-021-01341-x/MediaObjects/41592_2021_1341_MOESM4_ESM.avi
(Ergänzendes Material)

https://static-content.springer.com/esm/art%3A10.1038%2Fs41592-021-01341-x/MediaObjects/41592_2021_1341_MOESM5_ESM.avi
(Ergänzendes Material)

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Zitation

Frei, M. S., Tarnawski, M., Roberti, M. J., Koch, B., Hiblot, J., & Johnsson, K. (2022). Engineered HaloTag variants for fluorescence lifetime multiplexing. Nature Methods, 19, 65-70. doi:10.1038/s41592-021-01341-x.


Zitierlink: https://hdl.handle.net/21.11116/0000-0009-A743-F
Zusammenfassung
Self-labeling protein tags such as HaloTag are powerful tools that can label fusion proteins with synthetic fluorophores for use in fluorescence microscopy. Here we introduce HaloTag variants with either increased or decreased brightness and fluorescence lifetime compared with HaloTag7 when labeled with rhodamines. Combining these HaloTag variants enabled live-cell fluorescence lifetime multiplexing of three cellular targets in one spectral channel using a single fluorophore and the generation of a fluorescence lifetime-based biosensor. Additionally, the brightest HaloTag variant showed up to 40% higher brightness in live-cell imaging applications.